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      飼料中維生素B6測定方法
      來源: | 作者:飼料中維生素B6測定方法 | 發布時間: 2021-09-26 | 3169 次瀏覽 | 分享到:

      飼料中維生素B6測定方法 

      1、主題內容與適用范圍 
        本標準適用于配合飼料,預混合飼料,濃縮飼料中所添加維生素B6的測定。測定范圍為0.08~3.5μg/mL。 

      2、原理 
       用水提取,在pH7條件下,用熒光法測定維生素B6。 

      3 試劑和溶液 
        除特殊規定外,本標準所用試劑均為分析純,水為蒸餾水或相應純度的水。 
      3.1 pH7緩沖液   
      稱取29.3023g磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O,GB1263)和3.8115g檸檬酸(C6H8O7·H2O),HGB 3296)于100mL容量瓶中,用煮沸后冷卻的水,溶解并定容至刻度?;靹騻溆?。 
      3.2 維生素B6標準貯備溶液 
        稱取40mg(中國藥典參照標準)維生素B6,或復合維生素(中國藥典參照標準)B640mg,B1100mg,B250mg(精確至0.0001g)于100mL容量瓶中,加水溶解定容至刻度,此液1mL含400μg的維生素B6。 
      3.3 維生素B6標準工作溶液 
        吸?。?.2)貯備液1mL于100mL容量瓶中加水稀釋至刻度,混勻,此液1mL含4μg的維生素B6。 

      4、 儀器設備 
      4.1 熒光分光光度計; 
      4.2 分析天平:感量0.0001g。 
      4.3 實驗室用器皿 
        容量瓶1000mL,100mL,50mL,25mL。 
      刻度移液管10mL,5mL,1mL。 

      5、分析步驟 
      5.1 試樣的選取和制備 
       選取有代表性的試樣,粉碎通過0.28mm孔篩,用四分法縮減至100g,密封保存,以防試樣維生素B6變化或變質。 
      5.2 測定步驟 
      5.2.1 維生素B6的提取 
        稱取試樣(配合飼料,濃縮飼料,預混合飼料)0.5~2g,(精確至0.0001g)于100mL容量瓶中,加水溶解后,定容至刻度,振蕩1~2min,靜置待沉清,或離心(400r/min)10min。 
      5.2.2 試樣的測定 
        移取試樣的上清液1mL(≤40μgVB6)于25mL容量瓶中,加入(3.1)pH7緩沖液至刻度,混勻,用1cm石英比色杯,置入熒光分光光度計內,于激發波長326nm、發射波長395nm測定其熒光強度。 
        同時做空白試驗。 
      5.2.3 工作曲線的繪制 
        取0.00,0.50,1.00,1.50,2.00,2.50mL維生素B6標準工作液(3.3)分別于25mL容量瓶中,加入pH7緩沖液(3.1)至刻度,混勻,用1cm石英比色杯,置入熒光分光光度計內,于激發波長326nm、發射波長395nm測定其熒光強度,以熒光強度為縱坐標,維生素B6量為橫坐標,繪制工作曲線。 

      6、分析結果計算和表述   
      維生素B6的含量(mg/kg)按下式計算: 
      VB6(mg/kg)=M×D/W×(1000/1000)=M×D/W 
      式中:M──工作曲線上查得維生素B6含量,μg/mL; 
      W──試樣的質量,g; 
      D──試樣的總體積,mL。 

      7、允許差 
      7.1 每個試樣稱取兩份平行測定,取算術平均值為測定結果并保留兩位小數。 
      7.2 維生素B6含量少于40mg/kg以下,平行測定結果相對差值不大于10%,維生素B6含量大于40mg/kg的平行測定結果相對差值不大于5%


       

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